पीसीआर लैब डिज़ाइन आवश्यकताएँ क्या हैं?

सभी जानते हैं कि कई लैब हैं, तो पीसीआर लैब के बारे में कितने लोग जानते हैं? और पीसीआर प्रयोगशालाओं को डिजाइन करने के लिए बुनियादी आवश्यकताएं क्या हैं? फिर सभी के साथ चर्चा करने के लिए VOLAB ज़ियाओबियन होंगे~

1, पीसीआर प्रयोगशाला लेआउट

पीसीआर प्रवर्धन परीक्षण प्रयोगशाला सैद्धांतिक रूप से चार अलग-अलग कार्य क्षेत्रों में विभाजित है: अभिकर्मक भंडारण और तैयारी क्षेत्र, नमूना तैयारी क्षेत्र, प्रवर्धन प्रतिक्रिया मिश्रण तैयारी और प्रवर्धन क्षेत्र, और प्रवर्धन उत्पाद विश्लेषण क्षेत्र। क्रॉस संदूषण से बचने के लिए, प्रत्येक कार्य क्षेत्र में प्रवेश करने के लिए एक ही दिशा का कड़ाई से पालन करना चाहिए, अर्थात, केवल अभिकर्मक भंडारण और तैयारी क्षेत्र → नमूना तैयारी क्षेत्र → प्रवर्धन प्रतिक्रिया मिश्रण तैयारी और प्रवर्धन क्षेत्र → प्रवर्धन उत्पाद विश्लेषण क्षेत्र। प्रत्येक प्रायोगिक क्षेत्र के बीच अभिकर्मक और नमूना स्थानांतरण एक स्थानांतरण विंडो के माध्यम से किया जाना चाहिए।

2. प्रयोगशाला एयर कंडीशनिंग वेंटिलेशन सिस्टम डिजाइन और दबाव नियंत्रण

पीसीआर प्रयोगशालाओं में शुद्धिकरण की सख्त आवश्यकताएं नहीं हैं, लेकिन विभिन्न प्रायोगिक क्षेत्रों के बीच क्रॉस-{0}संदूषण की संभावना से बचने के लिए, पूर्ण-प्रवाह वायु वितरण प्रणाली का उपयोग करने की सलाह दी जाती है। साथ ही, प्रत्येक प्रायोगिक क्षेत्र की दबाव आवश्यकताओं को सुनिश्चित करने के लिए प्रेषण और निकास के अनुपात को सख्ती से नियंत्रित किया जाना चाहिए।

2.1, नमूना तैयारी क्षेत्र

इस क्षेत्र में मुख्य संचालन नमूनों का संरक्षण, न्यूक्लिक एसिड (आरएनए, डीएनए) का निष्कर्षण, भंडारण और प्रवर्धन प्रतिक्रिया ट्यूबों में उनका जोड़ और डीएनए संश्लेषण का निर्धारण है। इस क्षेत्र में दबाव प्रवणता की आवश्यकताएं हैं: निकटवर्ती क्षेत्र से इस क्षेत्र में एयरोसोल संदूषण से बचने के लिए निकटवर्ती क्षेत्र के सापेक्ष सकारात्मक दबाव। इसके अलावा, लोडिंग ऑपरेशन के दौरान एयरोसोल प्रेरित संदूषण की संभावना के कारण, क्षेत्र में अनावश्यक चलने से बचना चाहिए।

2.2. अभिकर्मक भंडारण और तैयारी क्षेत्र

इस प्रायोगिक क्षेत्र में मुख्य संचालन भंडारण अभिकर्मकों की तैयारी, अभिकर्मकों का वितरण और मुख्य प्रतिक्रिया मिश्रण की तैयारी है। नमूना तैयार करने के लिए उपयोग किए जाने वाले अभिकर्मकों और सामग्रियों को सीधे इस क्षेत्र में भेजा जाना चाहिए और अन्य क्षेत्रों से नहीं गुजरना चाहिए। अभिकर्मक कच्चे माल को इस क्षेत्र में संग्रहीत किया जाना चाहिए और क्षेत्र में आवश्यक भंडारण अभिकर्मकों में तैयार किया जाना चाहिए। वायुदाब के नियंत्रण के लिए कोई सख्त आवश्यकताएं नहीं हैं।

2.3, प्रवर्धन उत्पाद विश्लेषण क्षेत्र

इस क्षेत्र में मुख्य ऑपरेशन प्रवर्धित अंशों का निर्धारण है। यह क्षेत्र प्रवर्धित उत्पाद के संदूषण का मुख्य स्रोत है। इसलिए, इस क्षेत्र के लिए दबाव ढाल की आवश्यकताएं हैं: क्षेत्र से अन्य क्षेत्रों में प्रवर्धित उत्पादों के प्रसार से बचने के लिए आसन्न क्षेत्र के सापेक्ष नकारात्मक दबाव।

2.4, प्रवर्धन प्रतिक्रिया मिश्रण तैयारी और प्रवर्धन क्षेत्र

इस क्षेत्र में मुख्य ऑपरेशन डीएनए प्रवर्धन है। इसके अलावा, प्रतिक्रिया मिश्रण तैयार करने के लिए तैयार डीएनए टेम्पलेट (नमूना तैयारी क्षेत्र से) और मुख्य प्रतिक्रिया मिश्रण (अभिकर्मक भंडारण और तैयारी क्षेत्र से) को जोड़ना आदि भी इस क्षेत्र में किया जा सकता है। इस क्षेत्र में दबाव ढाल की आवश्यकताएं हैं: क्षेत्र से एयरोसोल रिसाव से बचने के लिए आसन्न क्षेत्र के सापेक्ष नकारात्मक दबाव। एरोसोल से होने वाले प्रदूषण से बचने के लिए, क्षेत्र में अनावश्यक घूमना कम से कम किया जाना चाहिए। नमूनाकरण जैसे व्यक्तिगत कार्य स्वच्छ बेंच में किए जाने चाहिए।

3.1. कार्य क्षेत्र का सख्त विभाजन

(1) प्रत्येक प्रायोगिक क्षेत्र की सेटिंग उचित है;

(2) विभिन्न प्रायोगिक क्षेत्रों में उपकरण वस्तुओं और अभिकर्मकों के बीच भ्रम से बचने के लिए प्रत्येक प्रयोगात्मक क्षेत्र में स्पष्ट निशान (जैसे हड़ताली घर के नंबर या अलग-अलग जमीन के रंग आदि) होने चाहिए।

3.2, उचित सिस्टम सेटिंग्स

(1) उचित वायु कंडीशनिंग वेंटिलेशन सिस्टम सेटिंग, पूर्ण वायु प्रेषण कंडीशनिंग सिस्टम का उपयोग करने का प्रयास करें;

(2) सख्त वायु प्रवाह दबाव नियंत्रण विभिन्न प्रयोगात्मक क्षेत्रों में विभिन्न दबाव आवश्यकताओं को सुनिश्चित करता है।

3.3, मानक संचालन

(1) प्रवर्धन निरीक्षण प्रयोगशाला के तकनीशियनों को कार्य प्रशिक्षण पर काम करना होगा और प्रशिक्षण उत्तीर्ण करने के बाद ही वे नैदानिक ​​जीन प्रवर्धन परीक्षणों में संलग्न हो सकते हैं;

(2) प्रायोगिक संचालन के दौरान, ऑपरेटर को दस्ताने पहनने चाहिए और उन्हें बार-बार बदलना चाहिए। इसके अलावा, ऑपरेशन के दौरान डिस्पोजेबल कैप का उपयोग भी संदूषण को रोकने के लिए एक प्रभावी उपाय है;

(3) सफाई का कार्य समय पर एवं सही हो। प्रयोग समाप्त होने के बाद, क्षेत्र को तुरंत साफ किया जाना चाहिए। सतहों के कीटाणुशोधन या पराबैंगनी लैंप के विकिरण और कीटाणुशोधन के लिए पारंपरिक कीटाणुनाशक तरल पदार्थों के अलावा, कुछ प्रायोगिक उपकरणों को भी उच्च दबाव नसबंदी के अधीन किया जाना चाहिए।

3.4, सख्त प्रबंधन

(1) प्रयोगशाला में प्रवेश करने और छोड़ने वाले कर्मियों पर सख्ती से नियंत्रण रखें। प्रयोग से असंबद्ध व्यक्ति अपनी इच्छानुसार प्रयोगशाला में प्रवेश नहीं करेंगे या बाहर नहीं निकलेंगे, और यदि आवश्यक हो, तो वे पूरे प्रायोगिक क्षेत्र में आने-जाने के लिए स्वतंत्र मार्ग और दरवाजे स्थापित करेंगे।

(2) क्रॉस-संदूषण की संभावना को कम करने के लिए प्रायोगिक क्षेत्र में अनावश्यक घूमना कम से कम करें।

(3) प्रवर्धित उत्पाद विश्लेषण क्षेत्र प्रवर्धित उत्पाद के संदूषण का सबसे महत्वपूर्ण स्रोत है। अपशिष्ट समाधान को प्रयोगशाला में डंप नहीं किया जा सकता है। इसे कीटाणुनाशक घोल में भिगोना चाहिए और फिर प्रयोगशाला से दूर किसी स्थान पर फेंक देना चाहिए। प्रयुक्त युक्तियाँ डिस्पोजेबल हैं। सामग्रियों को भी कीटाणुरहित और निष्फल किया जाना चाहिए और फिर समान रूप से उपचारित किया जाना चाहिए, जैसे कि भस्मीकरण;

(4) प्रवर्धन उत्पाद विश्लेषण क्षेत्र में कुछ जीन उत्परिवर्तन और विषाक्त पदार्थों का उपयोग किया जा सकता है, और प्रयोगकर्ता की सुरक्षा पर विशेष ध्यान दिया जाना चाहिए।

3.5. पूर्ण प्रयोगशाला सुविधाएं

प्रायोगिक कार्य सुनिश्चित करने के लिए पूर्ण प्रयोगशाला सहायक सुविधाएं आवश्यक शर्तें हैं। संबंधित उपकरण और उपकरणों को प्रत्येक प्रयोगशाला की अलग-अलग प्रयोगात्मक सामग्री के अनुसार सुसज्जित किया जाना चाहिए, जैसे अल्ट्रा-स्वच्छ बेंच, सेंट्रीफ्यूज और नमूना फीडर।